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淺析四種葉綠素測定方法

作者:投稿用戶  編輯:霍爾德儀器  更新時間:2026-03-20

淺析四種葉綠素測定方法,葉綠素含量是植物生長環(huán)節(jié)中一個重要的生理指標(biāo),由于其對周圍環(huán)境很敏感,并與植物的光合作用、營養(yǎng)吸收等密切相關(guān),被廣泛作為植物生長的常規(guī)測定指標(biāo)項目。葉綠素含量的測定方法有多種,在國際上以傳統(tǒng)的Arnon法(也稱研磨法)應(yīng)用Z為廣泛。但該法需要把植物材料研磨并經(jīng)轉(zhuǎn)移、過濾或離心處理,不僅工作量大,而且不可避免地使試驗人員較長時間與揮發(fā)于空氣中的試劑相接觸,對人體損害較大。近年來,直接浸取法受到重視,用不同配比的混合液對葉綠素進(jìn)行提煉,證明了用混合液提煉的可行性,并對傳統(tǒng)的Arnon法進(jìn)行了改進(jìn),將樣品冷凍處理后,用50℃丙酮靜置提煉并進(jìn)行測定,極大提高了工作效率。

淺析四種葉綠素測定方法

(1)研磨法:稱取0.5g樣品于研缽內(nèi),加入少量CaCO3和5mL80%的丙酮,將材料充分研磨細(xì)碎直至變白(約5min),轉(zhuǎn)移至10mL具塞離心管中,定容至刻度,搖勻后置于4℃冰箱中靜置12h,離心10min(2000r/min),取上清液測定。

(2)直接浸取法:稱取0.5g樣品放入10mL具塞離心管中,用80%丙酮定容至刻度,于暗柜中靜置72h浸取,取上清液測定。

淺析四種葉綠素測定方法

(3)樣品冷凍后用50℃提取液提煉法:稱取0.5g樣品于10mL具塞離心管中,置冰箱中冷凍2h,取出后加入10mL在水浴鍋中加熱至50℃的80%丙酮,充分振搖后于暗柜中靜置4h,取上清液測定。

(4)葉綠素計法:葉綠素計是所有方法中Z快捷的,你只需手持葉綠素計,將葉片插入儀器的感應(yīng)部位,然后合上測量探頭即可。應(yīng)用于這種測定的儀器又被叫做便攜式葉綠素儀,因為該葉綠素計擁有小巧的機(jī)身,僅200g的重量,可以方便地裝入口袋并帶到現(xiàn)場進(jìn)行測量。

淺析四種葉綠素測定方法

在以上幾種測定方法中,直接浸取法提煉效果Z好,但耗時長,傳統(tǒng)研磨法葉綠素的損失較大,冷凍后用50℃提取液提煉法操作簡便且提煉速度較快,在提煉率和穩(wěn)定性方面均顯示良好的優(yōu)越性。冷凍后用50℃提取液提煉法的Z優(yōu)試驗條件為將試驗材料冷凍1h后,靜置提煉3h.而葉綠素儀法,則相較于其他三種化學(xué)方法,更加快速方便。而且用SPAD-502測定葉綠素含量時,不會對葉片造成損傷,這也是使用葉綠素計的另一大好處。因為你不需要摘下葉片,直接用儀器夾住葉片測定即可,這樣就可以在作物的成長環(huán)節(jié)中全程對特定的葉片進(jìn)行監(jiān)測,進(jìn)而獲得更科學(xué)的分析結(jié)果


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